वेयल एलसीएमएस-टीक्यू9200 तरल गुणसूत्र-टैंडम द्रव्यमान स्पेक्ट्रोमेट्री प्रणाली द्वारा सोयाबीन तेल में एथिल माल्टोल सामग्री का निर्धारण

एथिल माल्टोल का व्यापक रूप से खाद्य उद्योग में एक अत्यधिक कुशल और व्यापक स्पेक्ट्रम स्वाद बढ़ाने वाले और संशोधक के रूप में उपयोग किया जाता है ताकि खाद्य उत्पादों में मीठे, फलदार और मलाईदार स्वादों को तीव्र और सामंजस्यपूर्ण बनाया जा सके। खाद्य योजकों के उपयोग के लिए चीन के राष्ट्रीय खाद्य सुरक्षा मानक (GB 2760-2024) के अनुसार, एथिल माल्टोल को विशिष्ट खाद्य श्रेणियों में उत्पादन आवश्यकताओं के अनुसार उचित स्तर पर उपयोग करने की अनुमति है।

हालांकि, चूंकि एथिल माल्टोल तेलों में ऑक्सीडेटिव ऑफ-फ्लेवर को प्रभावी ढंग से छिपा सकता है और उनके स्वाद को बढ़ा सकता है, इसलिए हाल के वर्षों में खाद्य वनस्पति तेलों, जिसमें सोयाबीन तेल भी शामिल है, में इसके अनाधिकृत मिश्रण की बार-बार घटनाएं हुई हैं। इसलिए, खाद्य सुरक्षा सुनिश्चित करने, उपभोक्ता अधिकारों की रक्षा करने और बाजार व्यवस्था बनाए रखने के लिए सोयाबीन तेल और अन्य खाद्य तेलों में एथिल माल्टोल के अवैध मिश्रण की निगरानी के लिए एक सटीक, संवेदनशील और कुशल विश्लेषणात्मक विधि स्थापित करना महत्वपूर्ण है।

सोयाबीन तेल में एक जटिल मैट्रिक्स संरचना होती है, जिसमें मुख्य रूप से ट्राइग्लिसराइड्स, मुक्त फैटी एसिड, फॉस्फोलिपिड्स और प्राकृतिक टोकोफेरॉल होते हैं। ये सह-अस्तित्व वाले घटक विश्लेषण के दौरान महत्वपूर्ण मैट्रिक्स हस्तक्षेप का कारण बन सकते हैं, जिससे लक्ष्य विश्लेषक एथिल माल्टोल का पता लगाना गंभीर रूप से प्रभावित होता है। लिक्विड क्रोमैटोग्राफी-टैंडम मास स्पेक्ट्रोमेट्री लिक्विड क्रोमैटोग्राफी की उत्कृष्ट पृथक्करण क्षमता को टैंडम मास स्पेक्ट्रोमेट्री की उच्च चयनात्मकता और उच्च संवेदनशीलता के साथ जोड़ती है। यह तकनीक खाद्य उत्पादों में ट्रेस अवैध योजकों के विश्लेषण और पहचान के लिए एक शक्तिशाली उपकरण बन गई है।

कीवर्ड:LCMS, सोयाबीन तेल, एथिल माल्टोल।

1. उपकरण और अभिकर्मक

1.1 LCMS का विन्यास सूची

तालिका 1 उपकरण विन्यास सूची

1.2 अभिकर्मक और मानक

तालिका 2 अभिकर्मक और मानकों की तालिका

1.3 प्रयोगात्मक सामग्री और सहायक उपकरण

अल्ट्रासोनिक क्लीनर

वॉर्टेक्स मिक्सर

उच्च गति अपकेंद्रित्र

2. प्रयोग विधि

2.1 लिक्विड क्रोमैटोग्राफी की स्थिति

कॉलम: C18, 1.7 μm, 2.1×50 मिमी

मोबाइल चरण: A: पानी में 0.1% फॉर्मिक एसिड; B: मेथनॉल में 0.1% फॉर्मिक एसिड

प्रवाह दर: 0.3 एमएल/मिनट

कॉलम तापमान: 40 ℃

इंजेक्शन वॉल्यूम: 2μL

2.2 पूर्व उपचार विधि

नमूने का 10 ग्राम (0.01 ग्राम तक सटीक) सटीक रूप से तौलें और इसे 50mL पॉलीप्रोपाइलीन अपकेंद्रित्र ट्यूब में स्थानांतरित करें। एक पिपेट का उपयोग करके 10 एमएल मेथनॉल सटीक रूप से डालें, 2 मिनट के लिए वर्टेक्स करें, और 4 डिग्री सेल्सियस पर 10 मिनट के लिए 9,000rpm/मिनट पर अपकेंद्रित करें। सुपरनेटेंट को 20mL स्नातक स्टॉपर टेस्ट ट्यूब में स्थानांतरित करें। शेष तेल परत के निष्कर्षण को एक और 10mL मेथनॉल के साथ दोहराएं, सुपरनेटेंट को मिलाएं, और मेथनॉल के साथ 20mL तक पतला करें। घोल को एक माइक्रोपोर्स झिल्ली (0.22μm, कार्बनिक चरण) के माध्यम से फ़िल्टर करें और इसका उपयोग लिक्विड क्रोमैटोग्राफी-टैंडम मास स्पेक्ट्रोमेट्री विश्लेषण के लिए करें।

2.3 घोल की तैयारी

2.3.1 एथिल माल्टोल मानक घोल: 100μg/mL

2.3.2 एथिल माल्टोल मानक कार्यशील घोल:एथिल माल्टोल मानक स्टॉक घोल को मेथनॉल के साथ क्रमिक रूप से पतला करें ताकि 1.25μg/mL, 2.5μg/mL, 5μg/mL, 25μg/mL और 50μg/mL की सांद्रता पर मानक घोल तैयार किए जा सकें। एक नकारात्मक नमूने का 10 ग्राम (0.01 ग्राम तक सटीक) सटीक रूप से तौलें जो परीक्षण नमूने के अनुरूप हो, प्रत्येक मानक घोल का 200μL अलग-अलग डालें, और मिश्रणों को निष्कर्षण के माध्यम से परीक्षण नमूनों के साथ एक साथ संसाधित करें। फिर 12.5ng/mL, 25ng/mL, 50ng/mL, 250ng/mL और 500ng/mL की अंतिम सांद्रता के साथ कार्यशील घोल तैयार किए। उपयोग से ठीक पहले इन घोलों को तैयार करें।

2.3.3 0.1% फॉर्मिक एसिड जलीय घोल:1mL फॉर्मिक एसिड लें और पानी के साथ 1000mL तक पतला करें। उपयोग से पहले एक झिल्ली (0.22μm, जलीय चरण) के माध्यम से फ़िल्टर करें।

2.3.4 मेथनॉल घोल में 0.1% फॉर्मिक एसिड:1mL फॉर्मिक एसिड लें और मेथनॉल के साथ 1000mL तक पतला करें। उपयोग से पहले एक झिल्ली (0.22μm, कार्बनिक चरण) के माध्यम से फ़िल्टर करें।

3. प्रयोग परिणाम

3.1 मानक क्रोमैटोग्राम

एथिल माल्टोल सामग्री का निर्धारण 7 मिनट के भीतर पूरा हो गया, जिसमें अच्छी चोटी का आकार और यौगिक प्रतिक्रिया थी, जो प्रयोगात्मक विश्लेषण की आवश्यकताओं को पूरा करती है।

चित्र 1 एथिल माल्टोल क्रोमैटोग्राम (250ng/mL)

3.2 रैखिक सीमा

एथिल माल्टोल मानक घोल के क्रमिक तनुकरण के माध्यम से मानक वक्र तैयार किया गया था। रैखिक सीमा 12.5–500ng/mL थी, जिसमें रैखिक पहचान परिणामों और ज्ञात सांद्रता के बीच विचलन अधिकतम अनुमेय विचलन से कम था। सभी R² मान 0.9999 से अधिक हो गए, जो उत्कृष्ट रैखिकता का संकेत देते हैं।

तालिका 3 यौगिकों की रैखिकता सीमा तालिका

चित्र 2 यौगिकों के रैखिकता परिणाम

3.3 LOD और LOQ

इस विधि में, 12.5ng/mL पर एथिल माल्टोल का सिग्नल-टू-शोर अनुपात (S/N) 10 से काफी अधिक है। जब S/N = 10 को मात्रात्मकता की सैद्धांतिक सीमा (LOQ) के रूप में परिभाषित किया जाता है, और S/N = 3 को पहचान की सैद्धांतिक सीमा (LOD) के रूप में परिभाषित किया जाता है। गणना की गई पहचान की सीमा (LOD) 1.07ng/mL है, और मात्रात्मकता की सीमा (LOQ) 3.56ng/mL है।

तालिका 4 यौगिकों का LOQ और LOQ

यौगिक	सिग्नल-टू-शोर अनुपात (S/N)	पहचान की सीमा (ng/mL)	मात्रात्मकता की सीमा (ng/mL)
एथिल माल्टोल	35.079	1.07	3.56

चित्र 3 यौगिकों का क्रोमैटोग्राम LOQ

3.4 सटीकता

अंतिम सांद्रता 25ng/mL तैयार करने के लिए एथिल माल्टोल मानक घोल में खाली विलायक और नकारात्मक नमूने लें, और सटीकता का मूल्यांकन करने के लिए लगातार 7 प्रतिकृतियां इंजेक्ट करें। परिणाम नीचे दी गई तालिका में दिखाए गए हैं। एथिल माल्टोल का RSD 3% के भीतर था, जो ≤15% की मानक सटीकता आवश्यकता को पूरा करता है।

तालिका 5 यौगिक सटीकता

यौगिक	नमूना	RSD
एथिल माल्टोल	स्पाइक किया गया मेथनॉल	2.407%
	स्पाइक किया गया सोयाबीन तेल	2.915%

चित्र 4 मेथनॉल स्पाइक नमूने का सटीकता क्रोमैटोग्राम

चित्र 5 सोयाबीन तेल स्पाइक नमूने का सटीकता क्रोमैटोग्राम

3.5 रिकवरी दर

100μg/mL एथिल माल्टोल मानक घोल को सोयाबीन तेल के साथ 25ng/mL तक पतला किया गया था। नमूना पूर्व उपचार, निष्कर्षण और निस्पंदन के बाद, सात लगातार इंजेक्शन किए गए ताकि रिकवरी दरों की तुलना की जा सके। परिणाम नीचे दी गई तालिका में दिखाए गए हैं। एथिल माल्टोल की रिकवरी दर 102.53% थी, जो 80%–120% की स्वीकार्य रिकवरी सीमा को पूरा करती है।

तालिका 6 यौगिक रिकवरी दर

यौगिक	स्पाइक की गई सांद्रता (ng/mL)	रिकवरी (%)
एथिल माल्टोल	25	102.53%

3.6 खाली अवशेष

मानक वक्र के उच्चतम बिंदु (500ng/mL) को इंजेक्ट करने के बाद, एक खाली अभिकर्मक इंजेक्ट किया गया था। गणना के बाद कोई खाली कैरीओवर नहीं पाया गया।

चित्र 6 खाली अवशेष क्रोमैटोग्राम

3.7 नमूना परीक्षण

पूर्व उपचार के बाद, सोयाबीन तेल के एक निश्चित ब्रांड का एक नमूना इंजेक्ट किया गया और कोई लक्ष्य यौगिक नहीं पाया गया।

चित्र 7 नमूना परीक्षण क्रोमैटोग्राम

4. निष्कर्ष

यह विधि सोयाबीन तेल में एथिल माल्टोल के निर्धारण के लिए Wayeal के LCMS-TQ9200 लिक्विड क्रोमैटोग्राफी-टैंडम मास स्पेक्ट्रोमेट्री सिस्टम का उपयोग करती है। डेटा से पता चलता है कि विधि के क्रोमैटोग्राफिक शिखर अच्छी चोटी का आकार दिखाते हैं जिसमें कोई टेलिंग नहीं है, और संवेदनशीलता आवश्यकताओं को पूरा करती है। रैखिक सहसंबंध गुणांक सभी 0.9999 से अधिक हैं, सटीकता 3% के भीतर है, और स्पाइक रिकवरी दरें 100% और 105% के बीच हैं। उच्च सांद्रता वाले नमूनों के लिए कोई सिस्टम कैरीओवर नहीं देखा गया। ये परिणाम दर्शाते हैं कि विधि, Wayeal के LC-MS/MS सिस्टम से सुसज्जित है, नमूनों में लक्ष्य विश्लेषक के लिए नियमित गुणात्मक और मात्रात्मक पहचान आवश्यकताओं को पूरा करती है।

TQ9200 लिक्विड क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री (LC-MS/MS) सिस्टम

LC3400 उच्च इंजेक्शन पुनरावृत्ति Hplc लिक्विड क्रोमैटोग्राफी इंस्ट्रूमेंट 75MPa

फार्मास्युटिकल उद्योग में 42MPa आइसोक्रेटिक हाई प्रेशर HPLC सिस्टम