2025-09-22
कीवर्ड: प्रोप्रानोलोल, उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी, नाइट्रोसामाइन अशुद्धियाँ
1. उपकरण और अभिकर्मक
1.1 एचपीएलसी सिस्टम की विन्यास सूची
| नहीं। | मॉड्यूलर | मात्रा |
| 1 | UV3400 UV डिटेक्टर | 1 |
| 2 | P3400B चतुर्धातुक पंप | 1 |
| 3 | CT3400 कॉलम ओवन | 1 |
| 4 | AS3400 ऑटोसैंपलर | 1 |
| 5 | SmartLab NetCDS वर्कस्टेशन | 1 |
| 6 | C18 250*4.6mm, 5μm | 1 |
1.2 अभिकर्मक और मानक समाधान
तालिका 2 अभिकर्मक और मानक समाधान
| नहीं। | अभिकर्मक और मानक | शुद्धता |
| 1 | एसीटोनिट्राइल | एचपीएलसी ग्रेड |
| 2 | सोडियम डोडेसिल सल्फेट | एआर |
| 3 | टेट्राब्यूटाइलअमोनियम डाइहाइड्रोजन फॉस्फेट | एआर |
| 4 | NaOH | एआर |
| 5 | सल्फ्यूरिक एसिड | एआर |
| 6 | एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल | 99.85% |
1.3 प्रयोग सामग्री और सहायक उपकरण
अल्ट्रासोनिक क्लीनर
वॉर्टेक्स मिक्सर
2. प्रयोग विधि
2.1 समाधान तैयारी
2.1.1 2mol/L सोडियम हाइड्रॉक्साइड घोल: 4g सोडियम हाइड्रॉक्साइड लें, 50mL पानी में घोलें, और अच्छी तरह मिलाएँ।
2.1.2 एसीटोनिट्राइल-पानी-सल्फ्यूरिक एसिड (55:45:0.1) मिश्रण: 1.6g सोडियम डोडेसिल सल्फेट और 0.31g टेट्राब्यूटाइलअमोनियम डाइहाइड्रोजन फॉस्फेट लें, 1mL सल्फ्यूरिक एसिड, 450mL पानी और 550mL एसीटोनिट्राइल डालें। 2 mol/L सोडियम हाइड्रॉक्साइड घोल के साथ pH 3.3 तक समायोजित करें, और अच्छी तरह मिलाएँ।
2.1.3 विलायक: मोबाइल चरण के समान।
2.1.4 रैखिक घोल: उचित मात्रा में एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल संदर्भ मानक को सटीक रूप से तौलें, मोबाइल चरण के साथ घोलें और पतला करें ताकि लगभग 200ng प्रति 1mL का घोल प्राप्त हो सके, जो मानक स्टॉक घोल के रूप में हो। फिर स्टॉक घोल की उचित मात्रा को छह 100mL आयतनमितीय फ्लास्क में सटीक रूप से स्थानांतरित करें, मोबाइल चरण के साथ निशान तक पतला करें, और 0.8ng/mL, 1ng/mL, 2ng/mL, 3ng/mL, 4ng/mL और 6ng/mL की सांद्रता के साथ मानक श्रृंखला के काम करने वाले वक्र तैयार करने के लिए अच्छी तरह मिलाएँ।
2.1.5 संदर्भ मानक घोल: उचित मात्रा में एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल संदर्भ मानक को सटीक रूप से तौलें, मोबाइल चरण के साथ घोलें और पतला करें ताकि लगभग 2ng एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल प्रति 1mL का घोल तैयार हो सके, जो संदर्भ मानक घोल के रूप में हो।
2.2 नमूना तैयारी
2.2.1 नमूना घोल: उचित मात्रा में बारीक पिसे हुए प्रोप्रानोलोल हाइड्रोक्लोराइड टैबलेट को सटीक रूप से तौलें, मोबाइल चरण के साथ घोलें और पतला करें ताकि लगभग 0.27mg प्रोप्रानोलोल प्रति 1mL का घोल तैयार हो सके, जो नमूना घोल के रूप में हो।
2.2.2 सटीकता घोल: लगभग 297mg बारीक पिसे हुए प्रोप्रानोलोल हाइड्रोक्लोराइड टैबलेट को 100mL आयतनमितीय फ्लास्क में सटीक रूप से तौलें। एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल संदर्भ मानक घोल की उचित मात्रा डालें, घोलें और मोबाइल चरण के साथ निशान तक पतला करें ताकि 100% स्पाइक्ड नमूना तैयार हो सके। सटीकता घोल प्राप्त करने के लिए अच्छी तरह मिलाएँ।
3. प्रयोग परिणाम
3.1 विशिष्टता
चित्र 2 विशिष्टता का क्रोमैटोग्राम
नोट: विलायक एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल का पता लगाने में हस्तक्षेप नहीं करता है, और परीक्षण घोल में अन्य अशुद्धियों के क्रोमैटोग्राफिक शिखर भी एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल अशुद्धता के निर्धारण में हस्तक्षेप नहीं करते हैं।
3.2 रैखिक परीक्षण
चित्र 3 एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल अशुद्धता का मानक वक्र
नोट: प्रायोगिक परिणाम बताते हैं कि एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल अशुद्धता परीक्षण वक्र का सहसंबंध गुणांक (R) 0.999 से अधिक है, जो परीक्षण की आवश्यकताओं को पूरा करता है।
3.3 पुनरावृत्ति परीक्षण
चित्र 4 2ng/mL मानक के लिए छह प्रतिकृति इंजेक्शन के क्रोमैटोग्राम
तालिका 3 2ng/mL मानक के लिए छह प्रतिकृति इंजेक्शन का डेटा
| यौगिक | प्रतिधारण समय (मिनट) | पीक एरिया (mAU*s) |
| एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल | 2.935 | 3.963 |
| 2.934 | 3.979 | |
| 2.933 | 3.984 | |
| 2.932 | 3.964 | |
| 2.932 | 3.996 | |
| 2.932 | 3.944 | |
| औसत | 2.933 | 3.972 |
| आरएसडी (%) | 0.043 | 0.464 |
नोट: जैसा कि ऊपर दी गई तालिका में दिखाया गया है, एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल की प्रतिधारण समय पुनरावृत्ति 0.043% है, और पीक एरिया पुनरावृत्ति 0.464% है, जो अच्छी पुनरावृत्ति को दर्शाता है।
3.4 सटीकता परीक्षण
चित्र 5 टैबलेट में एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल के ओवरलेड सटीकता क्रोमैटोग्राम
तालिका 4 प्रोप्रानोलोल हाइड्रोक्लोराइड टैबलेट की सटीकता (एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल)
| स्तर | पृष्ठभूमि स्तर (एनजी) | स्पाइक्ड मात्रा (एनजी) | पुनर्प्राप्त मात्रा (एनजी) | रिकवरी दर (%) | औसत (%) |
| 100% | 0.00 | 200.00 | 201.662 | 100.831 | 101.38 |
| 100% | 0.00 | 197.331 | 98.666 | ||
| 100% | 0.00 | 193.958 | 96.979 | ||
| 100% | 0.00 | 206.093 | 103.046 | ||
| 100% | 0.00 | 209.416 | 104.708 | ||
| 100% | 0.00 | 208.157 |
104.079 |
नोट: छह नमूनों में एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल की रिकवरी 96.98% से 104.71% तक थी, जिसकी औसत रिकवरी 101.38% थी। विधि अच्छी सटीकता और पुनरावृत्ति दिखाती है।
3.5 एलओडी परीक्षण
चित्र 6 2ng/mL मानक सांद्रता पर एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल का परीक्षण क्रोमैटोग्राम
तालिका 5 2ng/mL मानक सांद्रता पर एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल का संदर्भ परीक्षण डेटा
| नाम | प्रतिधारण समय (मिनट) | पीक एरिया (mAU*s) | एसएनआर |
| एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल | 2.946 | 3.994 |
39.689 |
नोट: ऊपर दी गई तालिका में 2ng/mL की सांद्रता पर एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल संदर्भ मानक के लिए परीक्षण डेटा के आधार पर, एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल के लिए सैद्धांतिक पता लगाने की सीमा 0.151ng/mL है, जिसमें 3:1 सिग्नल-टू-शोर अनुपात को पता लगाने की सीमा मानदंड के रूप में उपयोग किया जाता है।
3.6 एक ब्रांड टैबलेट परीक्षण
चित्र 7 एक ब्रांड टैबलेट का परीक्षण क्रोमैटोग्राम
नोट: ब्रांड टैबलेट में एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल का पता नहीं चला।
4. निष्कर्ष
एफडीए के हाल ही में प्रकाशित मार्गदर्शन दस्तावेज़ के अनुसार, प्रोप्रानोलोल हाइड्रोक्लोराइड टैबलेट में नाइट्रोसामाइन अशुद्धता एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल पर एक अध्ययन किया गया था, जो नाइट्रोसामाइन ड्रग सब्सटेंस-संबंधित अशुद्धियों (एनडीएसआरआई) के लिए स्वीकार्य सेवन स्तर स्थापित करने पर था। इस दस्तावेज़ के अनुसार, एआई (स्वीकार्य सेवन) मान 1500ng/दिन के रूप में गणना की जाती है। इस उत्पाद (200mg) की अधिकतम दैनिक खुराक को ध्यान में रखते हुए, टैबलेट में नियंत्रण सीमा 7.5ppm से अधिक नहीं होनी चाहिए। विधि सत्यापन एक यूवी डिटेक्टर से लैस वेयेल के उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (एचपीएलसी) श्रृंखला का उपयोग करके किया गया था। टैबलेट नमूनों का विश्लेषण मान्य पता लगाने की विधि का उपयोग करके किया गया था, और नाइट्रोसामाइन अशुद्धता एन-नाइट्रोसो-प्रोप्रानोलोल का पता नहीं चला। उपरोक्त सभी डेटा इंस्ट्रूमेंटेशन के लिए फार्माकोपियल आवश्यकताओं का अनुपालन करते हैं।
अपनी पूछताछ सीधे हमें भेजें
