2025-11-04
एक न्यूक्लियोटाइड के रूप में, यूरीडीन 5'-मोनोफॉस्फेट (UMP) जीवित जीवों के भीतर न्यूक्लिक एसिड चयापचय में एक महत्वपूर्ण मध्यवर्ती है। यह स्तनधारी दूध में सबसे प्रचुर मात्रा में पाया जाने वाला न्यूक्लियोटाइड है, और वंश की वृद्धि और विकास के दौरान अन्य न्यूक्लियोटाइड की तुलना में यूरीडाइलेट की आहार संबंधी आवश्यकता काफी अधिक होती है। हाल के वर्षों में, शोध से पता चला है कि UMP न केवल ऊर्जा चयापचय और RNA संश्लेषण में भाग लेता है, बल्कि सेलुलर सिग्नलिंग मार्गों को विनियमित करके आंतों की बाधा कार्यक्षमता को भी बढ़ाता है। इसके अतिरिक्त, यह पोषक तत्वों के अवशोषण और प्रतिरक्षा कार्य को बढ़ावा देने के लिए वसा में घुलनशील विटामिन के साथ तालमेल से काम करता है। UMP को आमतौर पर शिशु फार्मूला और पशुधन/पोल्ट्री फ़ीड में एक पोषण बढ़ाने वाले के रूप में जोड़ा जाता है, जहाँ इसकी शुद्धता और सांद्रता सीधे अंतिम उत्पाद के पोषण मूल्य और सुरक्षा को प्रभावित करती है।
कीवर्ड:खाद्य पोषण बढ़ाने वाला, UMP, न्यूक्लियोटाइड, उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी।
1. उपकरण और अभिकर्मक
1.1 HPLC की विन्यास सूची
सारणी 1 HPLC की विन्यास सूची
| सं. | मॉड्यूलर | मात्रा |
| 1 | LC3200 उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी | 1 |
| 2 | P3210B द्विआधारी उच्च दबाव पंप | 1 |
| 3 | CT3400 कॉलम ओवन | 1 |
| 4 | AS3210 ऑटोसैंपलर | 1 |
| 5 | UV3210 UV डिटेक्टर | 1 |
| 6 | SmartLab CDS 2.0 वर्कस्टेशन | 1 |
| 7 | नोवा एलिमेंट AQC18 5μm 4.6*250mm | 1 |
1.2 अभिकर्मक और मानक
सारणी 2 अभिकर्मक और मानक सूची
| सं. | अभिकर्मक और मानक | शुद्धता |
| 1 | 5'-मोनोफॉस्फेट | 96.2% |
| 2 | यूरीडीन | 98% |
| 3 | यूरैसिल | 98% |
1.3 प्रयोग सामग्री और सहायक उपकरण
अल्ट्रासोनिक क्लीनर
वॉर्टेक्स मिक्सर
2. प्रयोग विधि और शर्तें
क्रोमैटोग्राफी कॉलम: नोवा एलिमेंट AQC18, 5μm 4.6x250mm।
3. प्रयोग परिणाम
3.1 सिस्टम उपयुक्तता परीक्षण
सिस्टम उपयुक्तता परीक्षण से पता चला कि लक्ष्य शिखर अच्छी तरह से आकार का था, जिसमें उच्च सैद्धांतिक प्लेट गणना थी और इसके आसपास कोई हस्तक्षेप करने वाले शिखर नहीं थे, इस प्रकार सभी प्रयोगात्मक आवश्यकताओं को पूरा किया गया।
चित्र 1 यूरीडीन 5'-मोनोफॉस्फेट मानक कार्यशील घोल का क्रोमैटोग्राम
सारणी 3 यूरीडीन 5'-मोनोफॉस्फेट मानक कार्यशील घोल के लिए परीक्षण परिणाम
| यौगिक | प्रतिधारण समय (मिनट) | शिखर क्षेत्र (mAU*s) | शिखर ऊंचाई | टेलिंग फैक्टर | सैद्धांतिक प्लेट संख्या |
| UMP | 5.559 | 322.525 | 55.643 | 1.130 | 23689 |
3.2 पुनरावृत्ति परीक्षण
यूरीडीन 5'-मोनोफॉस्फेट (UMP) के मानक कार्यशील घोल को छह बार इंजेक्ट किया गया। प्रतिधारण समय का सापेक्ष मानक विचलन (RSD) 0.085% था, और शिखर क्षेत्र का 0.191% था। दोनों मान 2.0% की निर्दिष्ट सीमा से नीचे थे, जो प्रयोगात्मक आवश्यकताओं के अनुपालन को दर्शाता है।
चित्र 2 यूरीडीन 5'-मोनोफॉस्फेट (UMP) पुनरावृत्ति परीक्षण के क्रोमैटोग्राम
सारणी 4 यूरीडीन 5'-मोनोफॉस्फेट (UMP) के लिए पुनरावृत्ति परीक्षण परिणाम
| यौगिक | प्रतिधारण समय(मिनट) | शिखर क्षेत्र(mAU*s) |
| यूरीडीन 5'-मोनोफॉस्फेट | 5.559 | 322.525 |
| 5.559 | 323.013 | |
| 5.559 | 323.958 | |
| 5.561 | 322.753 | |
| 5.568 | 323.072 | |
| 5.569 | 322.141 | |
| RSD(%) | 0.085 | 0.191 |
3.3 नमूना परीक्षण
5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट मानक कार्यशील घोल (20mg/L) का शिखर क्षेत्र 322.525 था, जबकि परीक्षण नमूना घोल का 274.211 था। बाहरी मानक विधि के आधार पर, नमूने में UMP की मात्रा 17mg/L निर्धारित की गई थी।
चित्र 3 परीक्षण नमूने का क्रोमैटोग्राम
सारणी 5 नमूना परीक्षण परिणाम
| यौगिक | प्रतिधारण समय(मिनट) | शिखर क्षेत्र(mAU*s) | शिखर ऊंचाई | SNR | सैद्धांतिक प्लेट संख्या |
| 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट | 5.568 | 274.211 | 47.321 | 14710.024 | 24266 |
3.4 संबंधित पदार्थों के लिए सिस्टम उपयुक्तता परीक्षण
संबंधित पदार्थों के लिए सिस्टम उपयुक्तता घोल के परीक्षण से पता चला कि सभी यौगिक शिखर अच्छी तरह से आकार के थे, जिनमें उच्च सैद्धांतिक प्लेट संख्या और 2.0 से अधिक का संकल्प था, इस प्रकार प्रयोगात्मक आवश्यकताओं को पूरा किया गया।
चित्र 4 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट (UMP) मानक कार्यशील घोल का क्रोमैटोग्राम
सारणी 6 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट (UMP) मानक कार्यशील घोल के लिए परीक्षण परिणाम
| यौगिक | प्रतिधारण समय(मिनट) | शिखर क्षेत्र(mAU*s) | शिखर ऊंचाई | टेलिंग फैक्टर | सैद्धांतिक प्लेट संख्या |
| 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट | 5.570 | 326.631 | 8.682 | 1.121 | 24708 |
| यूरैसिल | 7.097 | 839.625 | 28.844 | 1.033 | 18284 |
| यूरीडीन | 17.367 | 446.693 | n.a. | 0.995 | 19136 |
3.5 नमूना पुनरुत्पादन परीक्षण
सिस्टम उपयुक्तता घोल के छह लगातार इंजेक्शन के बाद, 5'-UMP, यूरैसिल और यूरीडीन के लिए प्रतिधारण समय की पुनरावृत्ति क्रमशः 0.031%, 0.058% और 0.102% थी, जबकि शिखर क्षेत्र की पुनरावृत्ति क्रमशः 0.243%, 0.134% और 0.134% थी, जो प्रयोगात्मक आवश्यकताओं को पूरा करती है।
चित्र 5 नमूना पुनरुत्पादन परीक्षण का क्रोमैटोग्राम
सारणी 7 संबंधित पदार्थों के प्रतिधारण समय की पुनरावृत्ति के लिए परीक्षण परिणाम
| यौगिक | 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट | यूरैसिल | यूरीडीन |
| प्रतिधारण समय (मिनट) | 5.570 | 7.097 | 17.367 |
| 5.573 | 7.092 | 17.371 | |
| 5.571 | 7.089 | 17.360 | |
| 5.570 | 7.093 | 17.380 | |
| 5.570 | 7.091 | 17.363 | |
| 5.574 | 7.100 | 17.048 | |
| RSD (%) | 0.031 | 0.058 | 0.102 |
सारणी 8 संबंधित पदार्थों के शिखर क्षेत्र की पुनरावृत्ति के लिए परीक्षण परिणाम
| यौगिक | 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट | यूरैसिल | यूरीडीन |
| शिखर क्षेत्र | 326.631 | 839.625 | 446.693 |
| 326.175 | 841.410 | 447.261 | |
| 326.126 | 841.330 | 447.299 | |
| 327.412 | 842.394 | 448.319 | |
| 327.832 | 841.747 | 447.324 | |
| 327.850 | 842.911 | 448.083 | |
| RSD (%) | 0.243 | 0.134 | 0.134 |
3.6 संबंधित पदार्थों के लिए संवेदनशीलता परीक्षण
संबंधित पदार्थों के लिए संवेदनशीलता परीक्षण घोल में 5'-UMP मुख्य शिखर का सिग्नल-टू-शोर अनुपात 3 से काफी अधिक है, जो प्रयोगात्मक आवश्यकताओं को पूरा करता है।
चित्र 6 संबंधित पदार्थों के संवेदनशीलता परीक्षण घोल का क्रोमैटोग्राम
सारणी 9 संबंधित पदार्थों के संवेदनशीलता घोल के परीक्षण परिणाम
| यौगिक | प्रतिधारण समय(मिनट) | शिखर क्षेत्र(mAU*s) | शिखर ऊंचाई | SNR | सैद्धांतिक प्लेट संख्या |
| 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट | 5.573 | 26.797 | 4.638 | 949.156 | 24519 |
3.7 संबंधित पदार्थों के संदर्भ और नमूना घोल का परीक्षण
संदर्भ घोल (17 mg/L) का शिखर क्षेत्र 275.856 था। परीक्षण घोल में अशुद्धियों का कुल शिखर क्षेत्र, जिसमें 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट शामिल नहीं है, 38.021 था। बाहरी मानक विधि द्वारा गणना, नमूने में अशुद्धता की मात्रा 2.343mg/L है।
चित्र 7 संबंधित पदार्थों के संदर्भ घोल परीक्षण का क्रोमैटोग्राम
सारणी 10 संबंधित पदार्थों के संदर्भ घोल के परीक्षण परिणाम
| यौगिक | प्रतिधारण समय(मिनट) | शिखर क्षेत्र(mAU*s) | शिखर ऊंचाई | SNR | सैद्धांतिक प्लेट संख्या |
| 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट | 5.572 | 275.856 | 47.414 | 14576.232 | 24512 |
चित्र 8 संबंधित पदार्थों के नमूना घोल परीक्षण का क्रोमैटोग्राम
सारणी 11 संबंधित नमूना घोल के लिए परीक्षण परिणाम
| यौगिक | प्रतिधारण समय (मिनट) | शिखर क्षेत्र (mAU*s) | शिखर ऊंचाई | SNR | सैद्धांतिक प्लेट संख्या |
| 1 | 3.847 | 7.952 | 1.412 | 433.935 | 114734.178 |
| 2 | 4.178 | 4.358 | 0.710 | 218.248 | 11310 |
| 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट | 5.548 | 12576.642 | 1964.994 | 603778.520 | 196687.093 |
| यूरैसिल | 7.093 | 218.727 | 26.939 | 8277.393 | 18342 |
| यूरीडीन | 17.355 | 2810.366 | 145.230 | 44624.340 | 19058 |
4. निष्कर्ष
इस प्रयोग में, "GB 1903.69-2024 राष्ट्रीय खाद्य सुरक्षा मानक: खाद्य पोषण बढ़ाने वाला 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट" के संदर्भ में, विश्लेषण एक पराबैंगनी डिटेक्टर से लैस एक Wayeal LC3200 उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी सिस्टम का उपयोग करके किया गया था। प्रयोगात्मक परिणाम बताते हैं कि सिस्टम उपयुक्तता परीक्षण ने सभी यौगिकों के लिए अच्छे शिखर आकार, उच्च सैद्धांतिक प्लेट संख्या और 2.0 से ऊपर के संकल्प का प्रदर्शन किया, जो प्रयोगात्मक आवश्यकताओं को पूरा करता है। 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट मानक कार्यशील घोल और संबंधित पदार्थों के लिए प्रतिधारण समय की पुनरावृत्ति 0.2% से कम थी, और शिखर क्षेत्र की पुनरावृत्ति 0.3% से कम थी, जो अच्छी पुनरुत्पादन क्षमता को दर्शाता है। संबंधित पदार्थों के लिए संवेदनशीलता परीक्षण घोल ने 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट मुख्य शिखर के लिए सिग्नल-टू-शोर अनुपात 3 से काफी अधिक दिखाया, जो प्रयोगात्मक आवश्यकताओं को पूरा करता है। सभी नमूना परीक्षण परिणाम सामान्य थे। उपरोक्त डेटा मानक विधि में निर्दिष्ट उपकरण आवश्यकताओं को पूरा करते हैं।
अपनी पूछताछ सीधे हमें भेजें
