2025-11-04
एक न्यूक्लियोटाइड के रूप में, यूरीडीन 5'-मोनोफॉस्फेट (UMP) जीवित जीवों के भीतर न्यूक्लिक एसिड चयापचय में एक महत्वपूर्ण मध्यवर्ती है। यह स्तनधारी दूध में सबसे प्रचुर मात्रा में पाया जाने वाला न्यूक्लियोटाइड है, और वंश की वृद्धि और विकास के दौरान अन्य न्यूक्लियोटाइड की तुलना में यूरीडाइलेट की आहार संबंधी आवश्यकता काफी अधिक होती है। हाल के वर्षों में, शोध से पता चला है कि UMP न केवल ऊर्जा चयापचय और RNA संश्लेषण में भाग लेता है, बल्कि सेलुलर सिग्नलिंग मार्गों को संशोधित करके आंतों की बाधा कार्यक्षमता को भी बढ़ाता है। इसके अतिरिक्त, यह पोषक तत्वों के अवशोषण और प्रतिरक्षा कार्य को बढ़ावा देने के लिए वसा में घुलनशील विटामिन के साथ तालमेल से काम करता है। UMP को आमतौर पर शिशु फार्मूला और पशुधन/पोल्ट्री फ़ीड में एक पोषण पूरक के रूप में जोड़ा जाता है, जहाँ इसकी शुद्धता और सांद्रता सीधे अंतिम उत्पाद के पोषण मूल्य और सुरक्षा को प्रभावित करती है।
कीवर्ड:खाद्य पोषण फोर्टिफायर, UMP, न्यूक्लियोटाइड, उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी।
1. उपकरण और अभिकर्मक
1.1 HPLC की विन्यास सूची
तालिका 1 HPLC की विन्यास सूची
| नहीं। | मॉड्यूलर | मात्रा |
| 1 | LC3200 उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी | 1 |
| 2 | P3210B बाइनरी हाई प्रेशर पंप | 1 |
| 3 | CT3400 कॉलम ओवन | 1 |
| 4 | AS3210 ऑटोसैंपलर | 1 |
| 5 | UV3210 UV डिटेक्टर | 1 |
| 6 | SmartLab CDS 2.0 वर्कस्टेशन | 1 |
| 7 | नोवा एलिमेंट AQC18 5μm 4.6*250mm | 1 |
1.2 अभिकर्मक और मानक
तालिका 2 अभिकर्मक और मानक सूची
| नहीं। | अभिकर्मक और मानक | शुद्धता |
| 1 | 5'-मोनोफॉस्फेट | 96.2% |
| 2 | यूरीडीन | 98% |
| 3 | यूरैसिल | 98% |
1.3 प्रयोग सामग्री और सहायक उपकरण
अल्ट्रासोनिक क्लीनर
वॉर्टेक्स मिक्सर
2. प्रयोग विधि और शर्तें
क्रोमैटोग्राफी कॉलम: नोवा एलिमेंट AQC18, 5μm 4.6x250mm।
3. प्रयोग परिणाम
3.1 सिस्टम उपयुक्तता परीक्षण
सिस्टम उपयुक्तता परीक्षण से पता चला कि लक्ष्य शिखर अच्छी तरह से आकार का था, जिसमें उच्च सैद्धांतिक प्लेट गणना थी और इसके आसपास कोई हस्तक्षेप करने वाले शिखर नहीं थे, इस प्रकार सभी प्रायोगिक आवश्यकताओं को पूरा किया गया।
चित्र 1 यूरीडीन 5'-मोनोफॉस्फेट मानक कार्य समाधान का क्रोमैटोग्राम
तालिका 3 यूरीडीन 5'-मोनोफॉस्फेट मानक कार्य समाधान के लिए परीक्षण परिणाम
| यौगिक | रिटेंशन टाइम (मिनट) | पीक एरिया (mAU*s) | पीक हाइट | टेलिंग फैक्टर | सैद्धांतिक प्लेट नंबर |
| UMP | 5.559 | 322.525 | 55.643 | 1.130 | 23689 |
3.2 पुनरावृत्ति परीक्षण
यूरीडीन 5'-मोनोफॉस्फेट (UMP) के मानक कार्य समाधान को छह बार इंजेक्ट किया गया। रिटेंशन टाइम का सापेक्ष मानक विचलन (RSD) 0.085% था, और पीक एरिया का 0.191% था। दोनों मान 2.0% की निर्दिष्ट सीमा से नीचे थे, जो प्रायोगिक आवश्यकताओं के अनुपालन को दर्शाता है।
चित्र 2 यूरीडीन 5'-मोनोफॉस्फेट (UMP) पुनरावृत्ति परीक्षण के क्रोमैटोग्राम
तालिका 4 यूरीडीन 5'-मोनोफॉस्फेट (UMP) के लिए पुनरावृत्ति परीक्षण परिणाम
| यौगिक | रिटेंशन टाइम(मिनट) | पीक एरिया(mAU*s) |
| यूरीडीन 5'-मोनोफॉस्फेट | 5.559 | 322.525 |
| 5.559 | 323.013 | |
| 5.559 | 323.958 | |
| 5.561 | 322.753 | |
| 5.568 | 323.072 | |
| 5.569 | 322.141 | |
| RSD(%) | 0.085 | 0.191 |
3.3 नमूना परीक्षण
5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट मानक कार्य समाधान (20mg/L) का पीक एरिया 322.525 था, जबकि परीक्षण नमूना समाधान का 274.211 था। बाहरी मानक विधि के आधार पर, नमूने में UMP की मात्रा 17mg/L निर्धारित की गई थी।
चित्र 3 परीक्षण नमूने का क्रोमैटोग्राम
तालिका 5 नमूना परीक्षण परिणाम
| यौगिक | रिटेंशन टाइम(मिनट) | पीक एरिया(mAU*s) | पीक हाइट | SNR | सैद्धांतिक प्लेट नंबर |
| 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट | 5.568 | 274.211 | 47.321 | 14710.024 | 24266 |
3.4 संबंधित पदार्थों के लिए सिस्टम उपयुक्तता परीक्षण
संबंधित पदार्थों के लिए सिस्टम उपयुक्तता समाधान के परीक्षण से पता चला कि सभी यौगिक शिखर अच्छी तरह से आकार के थे, जिनमें उच्च सैद्धांतिक प्लेट संख्या और 2.0 से अधिक का रिज़ॉल्यूशन था, इस प्रकार प्रायोगिक आवश्यकताओं को पूरा किया गया।
चित्र 4 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट (UMP) मानक कार्य समाधान का क्रोमैटोग्राम
तालिका 6 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट (UMP) मानक कार्य समाधान के लिए परीक्षण परिणाम
| यौगिक | रिटेंशन टाइम(मिनट) | पीक एरिया(mAU*s) | पीक हाइट | टेलिंग फैक्टर | सैद्धांतिक प्लेट नंबर |
| 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट | 5.570 | 326.631 | 8.682 | 1.121 | 24708 |
| यूरैसिल | 7.097 | 839.625 | 28.844 | 1.033 | 18284 |
| यूरीडीन | 17.367 | 446.693 | n.a. | 0.995 | 19136 |
3.5 नमूना पुनरुत्पादकता परीक्षण
सिस्टम उपयुक्तता समाधान के छह लगातार इंजेक्शन के बाद, 5'-UMP, यूरैसिल और यूरीडीन के लिए रिटेंशन टाइम पुनरावृत्ति क्रमशः 0.031%, 0.058% और 0.102% थी, जबकि पीक एरिया पुनरावृत्ति क्रमशः 0.243%, 0.134% और 0.134% थी, जो प्रायोगिक आवश्यकताओं को पूरा करती है।
चित्र 5 नमूना पुनरुत्पादकता परीक्षण का क्रोमैटोग्राम
तालिका 7 संबंधित पदार्थों के रिटेंशन टाइम पुनरावृत्ति के लिए परीक्षण परिणाम
| यौगिक | 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट | यूरैसिल | यूरीडीन |
| रिटेंशन टाइम (मिनट) | 5.570 | 7.097 | 17.367 |
| 5.573 | 7.092 | 17.371 | |
| 5.571 | 7.089 | 17.360 | |
| 5.570 | 7.093 | 17.380 | |
| 5.570 | 7.091 | 17.363 | |
| 5.574 | 7.100 | 17.048 | |
| RSD (%) | 0.031 | 0.058 | 0.102 |
तालिका 8 संबंधित पदार्थों के पीक एरिया पुनरावृत्ति के लिए परीक्षण परिणाम
| यौगिक | 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट | यूरैसिल | यूरीडीन |
| पीक एरिया | 326.631 | 839.625 | 446.693 |
| 326.175 | 841.410 | 447.261 | |
| 326.126 | 841.330 | 447.299 | |
| 327.412 | 842.394 | 448.319 | |
| 327.832 | 841.747 | 447.324 | |
| 327.850 | 842.911 | 448.083 | |
| RSD (%) | 0.243 | 0.134 | 0.134 |
3.6 संबंधित पदार्थों के लिए संवेदनशीलता परीक्षण
संबंधित पदार्थों के लिए संवेदनशीलता परीक्षण समाधान में 5'-UMP मुख्य शिखर का सिग्नल-टू-शोर अनुपात 3 से काफी अधिक है, जो प्रायोगिक आवश्यकताओं को पूरा करता है।
चित्र 6 संबंधित पदार्थों के संवेदनशीलता परीक्षण समाधान का क्रोमैटोग्राम
तालिका 9 संबंधित पदार्थों के संवेदनशीलता समाधान के परीक्षण परिणाम
| यौगिक | रिटेंशन टाइम(मिनट) | पीक एरिया(mAU*s) | पीक हाइट | SNR | सैद्धांतिक प्लेट नंबर |
| 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट | 5.573 | 26.797 | 4.638 | 949.156 | 24519 |
3.7 संबंधित पदार्थों के संदर्भ और नमूना समाधान का परीक्षण
संदर्भ समाधान (17 mg/L) का पीक एरिया 275.856 था। परीक्षण समाधान में अशुद्धियों का कुल पीक एरिया, जिसमें 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट शामिल नहीं है, 38.021 था। बाहरी मानक विधि द्वारा गणना, नमूने में अशुद्धता की मात्रा 2.343mg/L है।
चित्र 7 संबंधित पदार्थों के संदर्भ समाधान परीक्षण का क्रोमैटोग्राम
तालिका 10 संबंधित पदार्थों के संदर्भ समाधान के परीक्षण परिणाम
| यौगिक | रिटेंशन टाइम(मिनट) | पीक एरिया(mAU*s) | पीक हाइट | SNR | सैद्धांतिक प्लेट नंबर |
| 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट | 5.572 | 275.856 | 47.414 | 14576.232 | 24512 |
चित्र 8 संबंधित पदार्थों के नमूना समाधान परीक्षण का क्रोमैटोग्राम
तालिका 11 संबंधित नमूना समाधान के लिए परीक्षण परिणाम
| यौगिक | रिटेंशन टाइम (मिनट) | पीक एरिया (mAU*s) | पीक हाइट | SNR | सैद्धांतिक प्लेट नंबर |
| 1 | 3.847 | 7.952 | 1.412 | 433.935 | 114734.178 |
| 2 | 4.178 | 4.358 | 0.710 | 218.248 | 11310 |
| 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट | 5.548 | 12576.642 | 1964.994 | 603778.520 | 196687.093 |
| यूरैसिल | 7.093 | 218.727 | 26.939 | 8277.393 | 18342 |
| यूरीडीन | 17.355 | 2810.366 | 145.230 | 44624.340 | 19058 |
4. निष्कर्ष
इस प्रयोग में, "GB 1903.69-2024 राष्ट्रीय खाद्य सुरक्षा मानक: खाद्य पोषण बढ़ाने वाला 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट" के संदर्भ में, विश्लेषण एक पराबैंगनी डिटेक्टर से लैस एक Wayeal LC3200 उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी सिस्टम का उपयोग करके किया गया था। प्रायोगिक परिणाम बताते हैं कि सिस्टम उपयुक्तता परीक्षण ने सभी यौगिकों के लिए अच्छे पीक आकार, उच्च सैद्धांतिक प्लेट संख्या और 2.0 से ऊपर के रिज़ॉल्यूशन का प्रदर्शन किया, जो प्रायोगिक आवश्यकताओं को पूरा करता है। 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट मानक कार्य समाधान और संबंधित पदार्थों के लिए रिटेंशन टाइम पुनरावृत्ति 0.2% से कम थी, और पीक एरिया पुनरावृत्ति 0.3% से कम थी, जो अच्छी पुनरुत्पादकता का संकेत देती है। संबंधित पदार्थों के लिए संवेदनशीलता परीक्षण समाधान ने 5'-यूरीडीन मोनोफॉस्फेट मुख्य शिखर के लिए सिग्नल-टू-शोर अनुपात 3 से काफी अधिक दिखाया, जो प्रायोगिक आवश्यकताओं को पूरा करता है। सभी नमूना परीक्षण परिणाम सामान्य थे। उपरोक्त डेटा मानक विधि में निर्दिष्ट उपकरण आवश्यकताओं को पूरा करते हैं।
अपनी पूछताछ सीधे हमें भेजें
