2024-08-22
इस लेख में पेश की गई विश्लेषणात्मक पद्धति, चीन के लोक गणराज्य के फार्माकोपिया के 2020 संस्करण के संदर्भ में एसाइक्लोविर परीक्षण पद्धति में,एक डीएडी डिटेक्टर के साथ Wayeal उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफ LC3200 श्रृंखला का उपयोग करके.
1उपकरण विन्यास और प्रयोग विधि
2.1 उपकरण विन्यास
| नहीं | नाम | मात्रा |
| 1 | P3210Q क्वाटरनरी पंप | 1 |
| 2 | CT3400 स्तंभ ओवन | 1 |
| 3 | AS3210 ऑटोसैंपलर | 1 |
| 4 | DAD3260 DAD डिटेक्टर | 1 |
| 5 | नोवा एटम पीसी18 4.6x250 मिमी 5μm | 1 |
| 6 | क्रोमैटोग्राफी कार्यस्थान | 1 |
2.2 प्रयोग विधि
2.2.1 अभिकर्मकों की तैयारी
तालिका 2 अभिकर्मकों की सूची
| नहीं | अभिकर्मक | शुद्धता |
|
1 2 3 4 5 |
मेथनॉल फॉस्फोरिक एसिड सोडियम हाइड्रॉक्साइड एसाइक्लोवीर ग्वानिन |
क्रोमैटोग्राफिक शुद्धता ((LC) GR एमओएस 98% 99 प्रतिशत |
2.2.1.1 परीक्षण समाधान: 40 मिलीग्राम नमूना 200 मिलीलीटर के मापने वाले फ्लास्क में लें, इसे भंग करने के लिए 2 मिलीलीटर 0.4% सोडियम हाइड्रॉक्साइड जोड़ें, फिर 25 मिलीलीटर 0.1% (V/V) फॉस्फोरिक एसिड सॉल्यूशन और इसे पानी से स्केल तक पतला करें, अच्छी तरह से हिलाओ।
2.2.1.2 संदर्भ समाधान: परीक्षण समाधान का 1 मिलीलीटर 100 मिलीलीटर के मापने वाले फ्लास्क में ले लें, 0.1% फॉस्फोरिक एसिड समाधान का 5 मिलीलीटर जोड़ें, पानी से पतला करें और अच्छी तरह से हिलाएं।
2.2.1.3 गुआनिन नियंत्रण भंडारण समाधान: 50 मिलीलीटर के माप कोल्ब में 10 मिलीलीटर गुआनिन संदर्भ लें, इसे भंग करने के लिए 5 मिलीलीटर 0.4% सोडियम हाइड्रॉक्साइड समाधान जोड़ें, फिर 5 मिलीलीटर 0.1% फॉस्फोरिक एसिड समाधान, इसे पानी से तराजू तक पतला करें, अच्छी तरह हिलाएं।
2.2.1.4 गुआनिन संदर्भ समाधान: गुआनिन संदर्भ भंडारण समाधान का 1 मिलीलीटर 100 मिलीलीटर के फ्लास्क में ले जाएं, पानी से पतला करें और अच्छी तरह से हिलाएं।
2.2.1.5 प्रणाली उपयुक्तता समाधानः संदर्भ समाधान और गुआनाइन संदर्भ समाधान में से प्रत्येक की उचित मात्रा लें, समान मात्रा में मिलाएं और अच्छी तरह से हिलाएं।
2.2.2 क्रोमैटोग्राफी स्थिति
तालिका 3 क्रोमैटोग्राफी की शर्तें
| क्रोमैटोग्राफी स्तंभ | नोवा एटम पीसी18 क्रोमैटोग्राफी कॉलम, 4.6*250 मिमी, 5μm | ||
| मोबाइल चरण | मोबाइल चरण A: पानी | मोबाइल चरण बी: मेथनॉल | |
| प्रवाह दर | 1 मिलीलीटर/मिनट | ||
| स्तंभ का तापमान | 35°C | तरंगदैर्ध्य | 254nm |
| इंजेक्शन वॉल्यूम | 20μL | ||
तालिका 4 मोबाइल चरण अनुपात
| समय (मिनट) | मोबाइल चरण ए | मोबाइल चरण बी |
| 0 | 94 | 6 |
| 15 | 94 | 6 |
| 40 | 65 | 35 |
| 41 | 94 | 6 |
| 51 | 94 | 6 |
3प्रयोग का परिणाम
3.1 सिस्टम उपयुक्तता समाधान
चित्र 1 सिस्टम उपयुक्तता समाधान का परीक्षण क्रोमैटोग्राम
तालिका 5 परीक्षण डेटा प्रणाली उपयुक्तता समाधान
| नहीं | यौगिक | भंडारण समय | शिखर क्षेत्र | सैद्धांतिक प्लेट संख्या | अलग होना |
| 1 | ग्वानिन | 5.698 | 138.675 | 17173 | 12.334 |
| 2 | एसाइक्लोवीर | 8.425 | 139.902 | 15786 | n.a. |
नोटः उपरोक्त ग्राफ और तालिका में दिए गए आंकड़ों से यह देखा जा सकता है कि एसाइक्लोविर और गुआनाइन में बेहतर शिखर आकार और उच्च सैद्धांतिक प्लेट संख्या है। पृथक्करण की डिग्री 3 से अधिक है।0, जो फार्माकोपिया की आवश्यकताओं को पूरा करता है।
3.2 दोहराई जा सकती है
चित्र 2 6 इंजेक्शन के दोहराव गुणसूत्र प्रणाली उपयुक्तता
तालिका 6 सिस्टम उपयुक्तता के 6 इंजेक्शन के दोहराव डेटा समाधान प्रतिधारण समय
| नमूना | नहीं | ग्वानिन | एसाइक्लोवीर |
|
भंडारण समय |
1 | 5.698 | 8.408 |
| 2 | 5.701 | 8.415 | |
| 3 | 5.705 | 8.411 | |
| 4 | 5.701 | 8.405 | |
| 5 | 5.705 | 8.401 | |
| 6 | 5.705 | 8.398 | |
| आरएसडी (%) | 0.048 | 0.074 |
तालिका 7 सिस्टम उपयुक्तता समाधान पीक क्षेत्र के 6 इंजेक्शन के पुनरावृत्ति डेटा
| नमूना | नहीं | ग्वानिन | एसाइक्लोवीर |
|
शिखर क्षेत्र |
1 | 136.997 | 138.836 |
| 2 | 138.496 | 139.117 | |
| 3 | 137.783 | 139.505 | |
| 4 | 136.663 | 138.204 | |
| 5 | 137.755 | 137.968 | |
| 6 | 137.789 | 139.374 | |
| आरएसडी (%) | 0.475 | 0.452 |
नोटः उपरोक्त तालिका के आंकड़ों के अनुसार, सिस्टम उपयुक्तता समाधान में गुआनीन और एसिक्लोवीर के प्रतिधारण समय का आरएसडी 0.048% और 0.074%, और पीक क्षेत्र का आरएसडी 0.475% और 0.0 है।452%पुनरुत्पादकता के परिणाम अच्छे हैं और प्रयोगात्मक आवश्यकताओं को पूरा करते हैं।
3.3 परीक्षण समाधान
चित्र 3 परीक्षण नमूना का क्रोमैटोग्राम
तालिका 8 परीक्षण नमूना के परीक्षण डेटा
| नमूना | यौगिक | भंडारण समय | शिखर क्षेत्र | चोटी की ऊंचाई | सैद्धांतिक प्लेट संख्या |
| परीक्षण नमूना | एसाइक्लोवीर | 8.385 | 22385.51 | 1806.31 | 10082 |
नोटः उपरोक्त क्रोमैटोग्राम और दिखाए गए आंकड़ों के अनुसार, परीक्षण नमूना के क्रोमैटोग्राम में कोई अन्य शिखर नहीं हैं, और शिखर का आकार अच्छा है, सैद्धांतिक प्लेट संख्या अधिक है,जो एसिक्लोवीर की परीक्षण विधि में गुआनीन और अन्य पदार्थों के विषय में फार्माकोपिया की सीमा की आवश्यकताओं को पूरा करता है.
3.4 नोट
सोडियम हाइड्रॉक्साइड अत्यधिक संक्षारक होता है, इसलिए समाधान तैयार करते समय सावधानी बरतें।
4निष्कर्ष
इस लेख में पेश की गई विश्लेषणात्मक पद्धति, चीन के लोक गणराज्य के फार्माकोपिया के 2020 संस्करण के संदर्भ में एसाइक्लोविर परीक्षण पद्धति में,एक डीएडी डिटेक्टर के साथ Wayeal उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफ LC3200 श्रृंखला का उपयोग करकेप्रयोगात्मक परिणामों से पता चला कि एसिक्लोविर और गुआनाइन में बेहतर चोटी के आकार और उच्च सैद्धांतिक प्लेट संख्या थी। पृथक्करण की डिग्री 3 से अधिक है।0फार्माकोपिया की आवश्यकताओं को पूरा करता है। सिस्टम उपयुक्तता समाधानों में गुआनिन और एसिक्लोवीर के लिए प्रतिधारण समय आरएसडी 0.048% और 0.074%, और पीक क्षेत्र आरएसडी 0 हैं।475% और 0पुनरावृत्ति के परिणाम अच्छे हैं और प्रयोगात्मक आवश्यकताओं को पूरा करते हैं।परीक्षण नमूना के क्रोमैटोग्राम में कोई अन्य शिखर नहीं हैं और शिखर का आकार अच्छा है और सैद्धांतिक प्लेट संख्या अधिक है, जो ग्वानिन और अन्य पदार्थों के अंतर्गत एसाइक्लोविर परीक्षण विधि की सीमा के लिए फार्माकोपिया की आवश्यकताओं को पूरा करता है।
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